细胞介绍
该细胞是由绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞和P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合得到的。该细胞不分泌免疫球蛋白，对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤有抗性，对HAT比较敏感；该细胞可以作为细胞融合时的B细胞组分用于制备杂交瘤。
基本信息
细胞别称：CVCL_DB48
细胞来源：脾脏
细胞形态：淋巴母细胞样
生长特性：悬浮生长
安全等级：BSL1
包装规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
倍增时间：3~4天
传代比例：3×10^5-5×10^5cells/mL
保藏机构：ATCC;CRL-;ATCC;CRL-;CCTCC;GDC
培养保存
培养体系：RPMI-+10%FBS
培养条件：气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃
冻存条件：基础培养基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
传代步骤
将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
冻存步骤
配置细胞冻存液，放置4℃预冷；
将培养瓶内细胞悬液用吸管完全吸出，转移到无菌离心管中，取细胞悬液计数；
rpm离心10min，弃去上清，加适量细胞冻存液，重悬细胞；
将细胞悬液分装到1ml冻存管中；(4℃预冷30min)
将冻存管转入程序降温盒中（程序降温盒需提前在4℃预冷），于-80℃过夜；
从程序降温盒中取出冻存管，快速转移到液氮中保存。
细胞用途
仅供科研使用。
质检结果
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
注意事项
1.收到常温细胞后，请检查产品包装状况，若发现破损、溢出及污染，请及时联系我们。2.先不打开培养瓶盖，用75%酒精处理培养瓶表面，如果是贴壁细胞，请在培养箱中静置2-3小时（根据细胞密度状况决定）用来稳定细胞状态。如果是悬浮细胞则不需要静置，直接按照悬浮细胞步骤操作。3.静置完成后，在显微镜下确认细胞生长状态并拍照记录。（照片能有效帮助我们提供售后服务）4.细胞培养过程中如有异常状况，欢迎进行技术交流。
